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紫外分光光度计测定葡萄糖的操作讲解
发布日期：2017-05-15 浏览次数：8681
紫外分光光度计
利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析。
葡萄糖是自然界分布广且为重要的一种单糖，它是一种多羟基醛。水溶液旋光向右，故亦称“右旋糖”。葡萄糖在生物学领域具有重要地位，是活细胞的能量来源和新陈代谢中间产物。植物可通过光合作用产生葡萄糖。在糖果制造业和医药领域有着广泛应用。
紫外分光光度计
如何快速测定葡萄糖呢？
一、材料、试剂：葡萄糖、糊精；葡萄糖氧化酶；草酸钛钾；麦芽糖；可溶性淀粉；0.9%氯化钠注射液；所用试剂均为分析纯；试验所用水为二次蒸馏水。
二、仪器与设备：紫外分光光度计；电子分析天平。
三、试验方法：
1、草酸钛钾溶液(0.0354 g/mL)的配制准确称取0.0354 g草酸钛钾分析纯置于1000μL的生理盐水中，充分溶解，备用。
2、葡萄糖标准溶液(0.1 g/mL)的配制准确称取0.1 g葡萄糖样品置于1000μL的生理盐水中，充分溶解，备用。
3、葡萄糖氧化酶标准溶液(100 U/250μL)的配制在装有100 U/10μL葡萄糖氧化酶的离心管中，加入240μL的生理盐水，混合均匀，备用。
4、样品中葡萄糖的测定测试时，首先分别移取150μL葡萄糖氧化酶、75μL草酸钛钾、175μL缓冲溶液至2.5 mL的石英比色皿中，再移取100μL检测试样至比色皿中，立即置于
紫外分光光度计
中，测量其在波长382 nm的吸光值，通过吸光值与葡萄糖质量浓度间的响应关系得知样品中葡萄糖的含量。
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