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紫外分光光度计测BSA浓度曲线时注意事项
  • 发布日期：2017-03-21      浏览次数：6025
      • 　　BSA即为牛血清白蛋白，在生化实验中有广泛的应用。BSA浓度可根据紫外分光光度计由曲线测得，到底是怎么一回事呢？
      　　紫外分光光度计测量蛋白浓度常可用经典公式：
      　　蛋白的浓度（mg/ml）=1.4280-0.74A260；
      　　也可同时读取一系列倍比稀释的已知蛋白含量的标准液的光密度值，做出标准曲线，后换算出浓度。
      　　紫外分光光度计测试需注意的是：
      　　1.用于仪器调零的液体与待测样品一致，标准蛋白也要使用同样的溶液；
      　　2.光密度值应该在0.1-0.8之间；
      　　3.要求蛋白质溶液*透明；
      　　4.对含量很低的蛋白质溶液可使用215/225nm的波长测定；
      　　5.使用蛋白质浓度范围为0.1-1.0mg/ml。
      　　配制浓度约为10mg/ml的BSA溶液，然后按一定倍数稀释，至低浓度为0.017mg/ml，用紫外分光光度计测试这一系列的BSA溶液的吸光度，做出标准曲线。根据测量结果而知，用紫外分光光度计测试牛血清白蛋白（BSA）的浓度，浓度太高曲线将逐渐平缓，而在0.02-2.0mg/ml浓度之间，基本能呈现出较好的线性。
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